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北京五洲元业生物工程有限公司 生产蛋白质研究相关产品
销售电话:010-83264770  86515144
第一部分　　蛋白质研究相关产品
Super ECL Plus超敏发光液 (Super ECL Plus Detection Reagent)

S1010     25 ml       380 元
100 ml       890 元
250 ml      1950 元

概述：
SuperECL Plus超敏发光液以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是，蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以第一抗体及辣根过氧化物酶HRP标记的第二抗体结合膜上的目的蛋白，或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用SuperECL Plus超敏发光液A液和B液等体积的混合工作液，在可见光下室温孵育膜数分钟，将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X光片曝光暗盒。然后转入暗室将X光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X光胶片上，可用扫描仪扫描。也可不进行X光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光CCD扫描。

SuperECL Plus超敏发光液采用采用独特的发光底物系统，检测灵敏度高出国际着名的Amersham和Santa Cruz公司同类ECL产品100倍以上，也明显高出国际着名Pierce公司的SuperSignal West Pico化学发光试剂1-5倍。并且，与国际公司的相应试剂相比，我们的SuperECL Western Blot的其它突出有点是，检测时产生的非特异背景非常低，也特别节省抗体(一抗1:2000-1:6000，二抗1:4000-1:10000)。

在暗房内，高丰度蛋白条带的荧光常常在长达10小时以上仍然肉眼可见，对X线胶片曝光1～30秒即可得到高清晰条带；低丰度蛋白条带荧光肉眼可能不易察觉，但曝光30秒至5分钟即可检测条带；极低丰度的蛋白条带荧光可允许几十分钟甚至12小时以上长时间曝光以检测目的条带。可检测少至数百个细胞的pico (10-12 ) 到femto (10-15 ) gram级的目的蛋白或核酸，是世界上最灵敏、发光时间最长、性能价格比最佳的ECL 化学发光试剂；特别适用于丰度极低而普通ECL发光试剂难于检测的蛋白或核酸条带。所发荧光可对X光胶片曝光，也可直接进行荧光CCD扫描。

特征：
? 灵敏度极高，检测10-100 fg抗原
? 高信噪比，背境干净
? 发光迅速，荧光可持续12小时
? 允许在日光灯下进行发光操作
? 特别节省抗体(一抗1:2000-1:6000，二抗1:4000-1:10000)
? 可用于凝胶胶内蛋白荧光检测

适用：直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP关联的蛋白Western Blot或核酸杂交。
组成：以100ml包装为例，含50 ml 溶液A和50 ml 溶液B。使用前混合。
储存：4 oC避光储存1年。25 oC室温放置数周不影响质量。
Super ECL超敏发光液 (Super ECL Detection Reagent)

S1020       25 ml           260 元
100 ml           650 元
250 ml          1200 元

概述：独特的发光底物和高灵敏度荧光ECL发光试剂，检测与辣根过氧化物酶HRP关联的蛋白或核酸。灵敏度明显高于Amersham和Santa Cruz公司的ECL发光试剂数十倍，与Pierce公司的SuperSignal West Pico化学发光系统相当，但背景更干净，发光时间更持久。与我们的SuperECL Plus超敏发光液(S1010)相比，灵敏度仅略微降低但背境极低，因而具有极高的信噪比，适用于多数蛋白或核酸检测。

特征：
? 高灵敏度，检测100 fg～1 pg抗原
? 极低的背境，极高的信噪比
? 发光持续12小时以上
? 节省抗体(一抗1:2000-1:6000，二抗1:4000-1:10000)
? 可用于凝胶胶内蛋白荧光检测

组成：
以100ml包装为例，含50 ml 溶液A和50 ml 溶液B。使用前混合。

适用：
直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP关联的蛋白或核酸底物。

保存：
4 oC避光储存1年。25 oC室温放置数周不影响质量。


BCIP/NBT片剂(碱性磷酸酶Western Blot显色底物)

S1050    40 ml/1片     260 元

概述：Schleicher and Schuell公司的BCIP/NBT片剂，内含NBT (Nitro blue tetrazolium)和BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate)底物以及完整的Buffer盐成分，ready to use。

使用时将1粒BCIP/NBT片直接溶于40ml蒸溜水，即形成完全符合碱性磷酸酶显色条件的底物反应溶液，pH 9.5。每粒BCIP/NBT片约重620mg，也可以把片剂压碎成粉末，按比例将每15mg压碎的粉末溶于1ml蒸馏水，将Western Blot膜浸入溶液即可显色。

适用：AP标记抗体显色，用于Western Blot膜显色，和免疫组化显色。

保存：4 oC避光储存。
蛋白提取制备相关产品
蛋白抽提试剂盒-I (实体组织和细胞蛋白抽提, 100 extractions)

S1250    100 次提取      700 元

概述：实体组织如大脑富含磷脂、神经纤维或血管壁含大量结缔组织、而脂肪则有大量油脂，常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。蛋白抽提试剂盒-I用于从各种实体软组织或细胞快速提取总蛋白。

用裂解-结合缓冲液匀浆裂解实体组织，或用裂解结合缓冲液振荡重悬培养细胞，然后加入抽提试剂去除非蛋白成分，离心分离即可得到总蛋白；简便高效，30-60分钟内完成提取。试剂盒可进行100次提取，可在1.5ml离心管微量提取也可大规模制备。每次可提取1～100 mg实体组织或1 x 107细胞。一次从10-100mg实体组织提取的总蛋白的量通常足以进行数十次Western Blot或免疫沉淀。

适用：(1) 各种实体软组织。如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等。
(2) 各种原代和传代细胞。

组成：(1) 裂解-结合缓冲液 100 ml；
(2) 抽提试剂 100 ml。 每毫升裂解缓冲液和抽提试剂可提取100 mg组织或1 x 107细胞。

储存：室温2年。


蛋白抽提试剂盒-II (液体样品蛋白抽提和回收，100 extraction)

S1255       100 次提取     480 元
             200 次提取     780 元

概述：蛋白抽提试剂盒-II 用于液体样品中蛋白浓缩、提取、或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。适用于各种液体样品(10 μl～1000 ml)，如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液。蛋白回收率95%，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot实验。可用1.5ml离心管微量提取也可大规模制备，15分钟完成提取，简便高效。

该试剂盒也适于从细胞悬液提取总蛋白。实体组织和细胞总蛋白提取可用蛋白提取试剂盒I (Cat S1250: Tissue/Cell Protein Extraction Kit)

适用：(1). 溶液、血液、尿液、脑脊液、培养上清液、胞浆胞核蛋白提取液等各种体液的蛋白浓缩和提取。
(2). 原代或传代细胞悬液，可按液体方式提取总蛋白。

组成：浓缩抽提试剂50ml。每0.5 ml浓缩试剂可处理100 μl溶液或5 x 106细胞。100次微量或10次大规模浓缩。

储存：室温



膜/疏水蛋白与亲水蛋白双相分离系统

S1256     50 extraction     550 元
           100 extraction     900 元

概述：真核组织30%以上的蛋白质为一次或多次跨膜蛋白如受体，分布于细胞膜和胞内各种质膜系统，而一些蛋白本身直接与脂质相连如脂蛋白。至少有70-80%的药物通过作用于这种膜/疏水蛋白而发挥作用。另外，许多蛋白在磷酸化、糖基化、烷基化时改变其亲水或疏水性质，由疏水趋于亲水或者由亲水趋于疏水，如蛋白转位并执行特定的功能。

膜/疏水蛋白与亲水蛋白双相分离系统(TansMem protein isolation system)提供快速简便的分离方案，在温度诱导下跨膜/疏水蛋白质选择性与亲水蛋白分离。真核组织、酵母细胞在非离子型去垢剂存在下裂解，冰上孵育10分钟；然后37度孵育30分钟，室温12000 rpm离心数分钟。溶液分为两相，亲水胞浆蛋白在上层水相，而跨膜蛋白和疏水蛋白质分布于下层相。由于下相体积极小，跨膜/疏水蛋白被选择性分离的同时也被高度(20倍以上)富集。整个过程不超过1小时。此试剂盒用于选择性分离膜/疏水蛋白与胞浆亲水蛋白、蛋白转位、2-D胶、Western Blot等研究。适用于动物、植物、细菌、酵母等各种组织。

适用：选择性分离跨膜/疏水蛋白与胞浆亲水蛋白、蛋白转位、2-D胶、Western Blot等。

规格： 50 assay, 25 ml Lysis buffer；50 ml Dilution buffer,
100 assay, 50 ml Lysis buffer；100 ml Dilution buffer,
One assay is sufficient for (1) 20-50 mg动物组织，(2) 0.05 ml 湿润的细胞沉淀，适于真核细胞、酵母、细菌，(3) 50~200 mg 植物组织。
储存：4 oC


RIPA裂解液 (RIPA Lysis Buffer)

S1053   100 ml    220 元

概述：RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，可能是经典但最常用的细胞组织快速裂解液。使用RIPA Buffer制备用于Western特别是用于免疫共沉淀的裂解产物已经是一种首选的标准操作，适用于大部分抗原表位的检测，特别适用免疫共沉淀检测蛋白质-蛋白质之间的相互作用。我们提供的RIPA Buffer的成分为：50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.1% SDS，适于绝大多数蛋白-蛋白相互作用的免疫共沉淀。

组成：100 ml RIPA Buffer：50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.1% SDS.
保存：?20 oC or 4 oC

培养细胞裂解 ：
1. 贴壁细胞，去除培养液，用PBS洗一遍。悬浮细胞，离心收集，PBS洗一遍。洗去血清中lgG干扰对免疫共沉淀是有益的，但对Western Blot可能并非必要。
2. 通常每106个细胞可加0.1 ml RIPA buffer。这大致相当于6孔板的单孔(1-2 x106细胞)加入0.1~0.15 ml，或一个75 cm2培养瓶(1-2x107细胞)加1~2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA buffer不足量，细胞裂解效率将会降低。
3. 冰上放置数分钟，细胞裂解。可用枪头轻轻吹打。轻轻倾斜培养皿使裂解产物流向瓶皿的一边或一角，然后将之转移到1.5 ml离心管。剧烈振荡30秒。
4. 12,000×g，4 oC离心5分钟，取上清，即可进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

组织块裂解：
1. 组织剪切成细小的碎片。每100毫克组织加入1 ml RIPA裂解液。用玻璃匀浆器匀浆上下手动匀浆20次。
2. 将匀浆物转移到1.5 ml离心管。
3. 12,000×g，4 oC离心5分钟，取上清，即可进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

说明：
1. 裂解液临用前可新鲜加入最终浓度为1mM的PMSF或其它蛋白酶抑制剂。所幸的是对大多数蛋白质而言，不加蛋白酶抑制剂可能也不会有明显影响。
2. RIPA裂解液中蛋白样品含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法但可用BCA法或改良Lowry法测定蛋白浓度。我公司有上述三种蛋白浓度测定试剂盒。


变性/非变性细胞裂解产物制备试剂盒 (CellysateTM preparation Kit)

N1054    100 次制备     400 元

概述：变性/非变性细胞裂解产物制备试剂盒 (CellysateTM preparation Kit，N1054)包括变性(N1052)或
变性(N1050)裂解缓冲液，提供完整的细胞蛋白制备方案。

非变性细胞裂解缓冲液(Nondenaturing Lysis Buffer, N1050)内含非离子型去垢剂和盐，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。

变性细胞裂解缓冲液(Denaturing Lysis Buffer，N1052)用于变性裂解，适宜于如下几种情况：(1) 抗原是不溶性蛋白，如不溶性的细胞骨架和膜蛋白或高度疏水蛋白；(2) 抗原位点隐匿于蛋白高级折叠结构之中；(3) 易集聚沉淀的蛋白；(4) 体外翻译产生的蛋白。

在含离子型去垢剂的变性细胞裂解缓冲液(N1052)中加热裂解细胞，可在变性条件下释放蛋白。随后，将变性蛋白裂解产物10倍稀释于非变性细胞裂解缓冲液(N1050)中；变性裂解产物中的离子型去垢剂将被溶液中过量的非离子型去垢剂包裹进入到微小的微粒之中，从而恢复变性蛋白的抗原抗体结合活性。适宜于蛋白免疫共沉淀或Western Blot研究。

组成:
(100 preparations each for 0.5-2 x 107 cells )
(1) 非变性细胞裂解缓冲液(#C1050), 100 ml;
(2) 变性细胞裂解缓冲液(#C1052), 15 ml

适用：蛋白免疫共沉淀，Western Blot

储存：4 oC避光。


非变性裂解缓冲液 (Nondenaturing Lysis Buffer)

N1050     100 ml  280元

概述：非变性细胞裂解缓冲液(Nondenaturing Lysis Buffer, #C1050)内含非离子型去垢剂、盐、和蛋白磷酸酶抑制剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。

Features and Applications:
Extract soluble proteins
Suitable for immunoprecipitation or Western Blotting

组成:(100 preparations each for 0.5-2 x 107 cells )
非变性细胞裂解缓冲液 100 ml

适用：蛋白免疫共沉淀，Western Blot

储存：4 oC避光。


变性裂解缓冲液 (Denaturing Lysis Buffer)

N1052   50 ml    220 元

概述：变性细胞裂解缓冲液(Denaturing Lysis Buffer，#C1052)用于变性裂解，适宜于如下几种情况：(1) 抗原是不溶性蛋白，如不溶性的细胞骨架和膜蛋白或高度疏水蛋白；(2) 抗原位点隐匿于蛋白高级折叠结构之中；(3) 宜于集聚并形成沉淀的蛋白；(4) 体外翻译产生的蛋白。

组成:
(100 preparations each for 0.5-2 x 107 cells )
变性细胞裂解缓冲液 50 ml

适用：蛋白免疫共沉淀，Western Blot

储存：4 oC避光。


胞核-胞浆蛋白制备试剂盒 (Nuclear-Cytosol Extraction Kit)

S1200     50 次制备      560 元
          100 次制备      850元

概述：提供全套试剂从哺乳动物组织和细胞制备核蛋白和/或胞浆蛋白。无需超速离心，制备过程可在1小时内完成。制备的可溶性核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，而且绝少交叉污染；可胜任转录活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blot、酶活性测定等。

组成：
(100 assays, 5-10 x 106 cells per assay)

Cytosol Extraction Buffer A (CEB-A)，50 ml
Cytosol Extraction Buffer B (CEB-B)，2 x 1.5 ml
Nuclear Extraction Buffer (NEB)，10 ml

储存：4 oC避光保存1年。

相关产品推荐：S1201: 细胞核-胞浆-胞膜制备试剂盒 (Nucl-Cyto-Mem Preparation Kit)，可从组织或培养细胞中同时制备细胞核、细胞膜与胞内质膜、细胞浆亚细胞组分


胞核-胞浆-胞膜制备试剂盒

S1201      50 次制备        750 元
           100 次制备       1200元

概述：Nucl-Cyto-Mem Preparation Kit从哺乳动物新鲜或冻存的组织块、贴壁或悬浮培养细胞中，制备细胞核、细胞膜与胞内质膜、细胞浆等三种主要亚细胞组分。独特的试剂成分与优化的制备方案相结合，使胞核-胞膜-胞浆制备简单易行。无需特殊设备和超速离心，只需要玻璃匀浆器和微型高速离心机，在1小时内完成。

制备的细胞核、细胞浆组分纯度甚高，而且较少交叉污染。单一的细胞膜的纯化是一个特殊问题，本试剂盒制备的胞膜是细胞膜和细胞器如线粒体、内质网、高尔基体及其质膜的混合物。制备的细胞核是完整的未裂解的细胞核，但胞浆组分为可溶性胞浆蛋白。制备的亚细胞组分的纯度可胜任后续免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot、酶活性测定、受体分析等。

组成：
(100 extractions, 8 x 106 ~ 1 x 107 cells per extraction)
CER, Cytosol Extraction Reagent，50 ml
MER, Membrane Extraction Reagent，5 ml
NER, Nuclear Extraction Reagent，100 ml
Suspension Buffer，20 ml

储存：4 oC避光保存1年。

注意：
1. 制备的亚组分可直接进行蛋白含量测定、酶活性测定、受体分析。但进行免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot之前，需要1:1加入自备的2x样品缓冲液(含去垢剂如NP-40、Triton X-100、SDS)。用户可不用Kit中的Suspension Buffer，而直接用自行配制的样品缓冲液重悬胞核或胞浆沉淀。
2. 如果为凝胶阻滞实验(EMSA)目的提取核蛋白，建议用S1200: 核-胞浆蛋白制备试剂盒 (Nuclear-Cytosol Extraction Kit)，该试剂盒并非提取完整的细胞核，而是直接提取可溶性核蛋白，可用于EMSA或Western Blot分析。


细胞核制备试剂盒

N1201    50 isolation    330 元
         100 isolation    600 元

概述：在破碎组织细胞时加入活化剂，帮助裂解细胞，反复振荡或使用剪切力释放细胞核，然后在温和条件下低速离心收集细胞核。制备在30-60分钟内完成，无需特殊设备，简便易行，重复性好。适用于从组织块、贴壁或悬浮培养细胞制备完整的高纯度细胞核。制备的细胞核仍然保持其在细胞内所具有的形状和大小，是进行细胞核组分亚分级和相关实验的理想材料，是研究蛋白核转位、DNA-蛋白相互作用，以及进行Western Blot和免疫共沉淀的理想材料。

组成：100 ml Buffer N1, 5 ml Reagent A, 100 ml Buffer N2, for 100 preparations。
储存：短期4 oC，长期?20 oC。
适用：从组织块、贴壁或悬浮培养细胞制备完整的细胞核。


线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒

N1260    50 isolation      500 元
          100 isolation      850 元

概述：线粒体参与能量代谢过程，参与细胞凋亡与老化等信号转导过程，参与退行性疾病如帕金森氏病，肿瘤等病理过程。线粒体/胞浆分离试剂盒 (Mitochondria Isolation Kit)用于从组织或培养细胞中分离线粒体和胞浆成分。加入缓冲液匀浆破碎组织或培养细胞，经过数次800g和12000g离心，在60分钟内即可分离出完整的线粒体和胞浆成分。用于Western Blot、2D-胶、ELISA、酶学测定、线粒体蛋白或DNA提取、蛋白质组学等研究。

组成：Mito-Cyto Isolation Buffer 90 ml/50 preparation, 180 ml/100 preparation。
储存：短期4 oC，长期-20 oC。
适用：从组织、培养细胞制备线粒体。

制备程序：
1. a. 组织匀浆：称取50-200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS冲洗，用剪刀剪为0.5cm2碎块放入小容量玻璃匀浆器内。估计组织块总体积。加入1.5 ml冰预冷的Mito-Cyto Buffer。上下研磨组织20次。
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞。加入1.5 ml冰预冷的Mito-Cyto Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内。用间隙严密的研杵研磨细胞30-40次。

2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管。800 × g 离心5 min 4 oC。细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等在管底。

3. 收集上清液并转移到新的离心管。800 × g 离心5 min at 4 oC。弃沉淀

4. 将上清液转移到新的离心管。12,000 × g 离心10 min 4 oC。离心后的上清含胞浆成分，将上清转移到新离心管。线粒体沉淀在管底。

5. 洗涤线粒体：清除管内壁粘连的液体和碎片，加入0.2 ml Mito-Cyto Buffer重悬线粒体沉淀，12,000 × g 离心10 min 4 oC。弃上清。

6. 用Mito-Cyto Buffer或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，50 μl/每100 mg组织，100 μl/5 × 107个细胞。测定蛋白浓度。立即使用或?70 oC保存。

注意：
1. 为保证获得完整的线粒体，第一是全程低温操作，将样品管放在冰水浴而不是碎冰块中。第二是快速。微量制备比大规模制备操作更方便和快速，因而更容易获得完整的线粒体。第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。在相差显微镜下检查未裂解细胞应在~50%左右即可。过度研磨将破坏线粒体，研磨不足将降低得率。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入样品缓冲液裂解线粒体。
4. 细胞色素c氧化酶可用作线粒体的标志酶。
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十日三角

及时雨升级通告

亲爱的玩家：
掸指一挥间，广大传奇玩家已经陪及时雨外挂走过了3年的风风雨雨，其间有欢笑，也有无奈，前段时间域名出问题、网上盗版版本满天飞....但广大玩家始终站在我们这边，支持、鼓励我们，这使我们感到非常欣慰。为答谢新老玩家对我们的不懈支持，我们又推出了及时雨的最新版本---及时雨PK版V7.82。相比上一版本V7.75，新增如下功能：
⑴、增加技能自动避开火墙。
⑵、增加单键魔法。
⑶、增加自定义复活时间设置。
⑷、增加上线自动输入命令。
⑸、新增在全景地图中显示游戏地形。
⑹、改进持续开盾、自动开盾、接近开盾、持续隐身、自动隐身、接近隐身。
⑺、修正快速传送快捷键：ALT+鼠标右键。
⑻、修正错位野蛮中的错误。
⑼、修正上一版本中的几处错误。
⑽、修正用快捷键开启移动刺杀时会将隔位刺杀也开启。
⑾、修正切换人物有时不能自动读取存档。
⑿、修正上一版本中显示游戏地形功能不能正常显示某些地图，及不能在真彩色窗口模式下正常显示。
⒀、调整移动刺杀移位。
⒁、重新整理帮助文件。

请各玩家从我们官方网站下载使用。这里提醒一下，及时雨的官方网址为： www.920jsy.com www.jsy3721.com，我们不能够保证从其他地方下载的是正宗的及时雨。
附注：及时雨PK版V7.82下载地址：
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下载及时雨，认准920JSY！ 使用正版，享受安全！
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网络营销软件与SEO外部链接策略



SEO外部链接策略-论坛,BBS,社区外链www
　　有过3年以上的BBS经验,从毫不了解的菜鸟,到论坛灌水疯狂者,再到斑竹,总管理员,活动策划.一路经历了很多,对BBS这块热土也是深有感情,接触SEO以后,SEO外部链接建设我并没有像普通的SEOer那样将主战场投向blog,而是BBS.下面讲解一下SEO外部链接网络营销软件论坛篇.h

　　1.个人资料网址.oipiio[[[

　　在个人资料里填写网址,这是一个普遍的SEO链接策略,但经过发现,网络营销软件群发这招对于引蜘蛛比较有效果,而对外部链接的质量来讲并不是很好,因为当你在论坛里发贴回贴的时候,蜘蛛抓取的文字链接描述为:"主页","个人主页""个人网站"等,如此的行为是不是稀释了你的外部链接的描述影响,使得蜘蛛无法辨别被链接网站的性质.而且从论坛的发贴回帖数量较大的话,稀释程度越高,特别是比较热门的论坛,bbs,他们被蜘蛛收录抓取都特别频繁,你的不相关描述量上去了,链接要突出的描述核心度就下来了.所以建议撤掉,前期引蜘蛛可以尝试。

　　2.签名

　　签名广告在许多论坛一般都是不让出现链接www.lihuida.com www.uf99.com www.3uf.com www.vhvf.com,其实这很好,纯粹的无描述链接意义并不是很大.而有描述链接,有的为骗得点击和流量,用诱导性的广告词描述,这样或许能带来IP,但肯定PV不会很高,这和诱导的手法类似.所以建议用自己想SEO的关键词或长尾相关关键词结合点广告创意做链接描述,这样即可以达到带来IP的效果,PV也不会受影响,而蜘蛛抓取的链接描述也很符合SEO.论坛群发软件公司和客户双方需求的满足论坛群发软件
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　　3.发贴回帖

　　网络营销软件群发软文贴在BBS很常见,在网络营销,SEO比较火热的年代,这招很体现一个SEOer或站长的水平,而且效果也比较好,大部分人发贴将链接的描述会处理得很好(如果处理得不好,请提高软文水平).但回帖纯粹的广告性质太多,还有就是回帖广告和主题的相关性.其实外部链接不只是描述和站点的权威性来决定质量,一个综合性社区,里面会分不同的栏目,栏目下也可能有不同类型的贴www.lihuida.com www.uf99.com www.3uf.com www.vhvf.com,所以回帖外链策略同时要注重回复主体的title,(大部分帖子主题title为帖子名+版块名+网站名),所以外链建设要考虑此因素进去.

　　其实还有重要的一点就是论坛发链接的时效性,选择性.时效性是对于过期的火星主题,搜索引擎已经收录了很多词类主题,回复此类帖子做外链,蛛蛛重复抓取的几率不是很大.所以要选择对的时机,对的主题.回复热门主题,精华主题的外部链接比回复无意义的主题链接效果要好得多.

　　总结来说,论坛,bbs,社区的SEO外部链接策略应该注重:链接描述相关性,发表回复主题的时效性,链接与主题的相关性.

　　最后送给大家一句:细节决定成败!



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子门入八

剧情看点： 纯粹的密阳人带来最真实的密阳生活，片中申爱和宗灿身边的人物全部由密阳本地人出演，因为有他们的存在，《密阳》才放射出璀璨耀眼的现实光芒。
英文片名: Secret Sunshine
主演： 全度妍 宋康昊
导演： 李沧东
类型： 影视/影片
文件格式： rmvb
推荐指数： ★★★★★
上映日期： 2007-12-09

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两亲土后

利惠达:SEO新手获取外部链接的最佳方式Submitted by 3ufblog on 2007, December 12, 3:31 PM. 群发软件技能与技巧

大多SEO草根心里都明白外部链接是搜索引擎优化中很重要的因素，所以大家都使着劲的找外部链接，点石上的有篇文章还翻译了一篇《增加反向链接的101个方法》，这篇文章总结得很好，不过有些还是不适合中国国情的，咱们结合里面的总结几种获取外部链接的最佳方式。

一、人脉链接 ccc

人脉你打通了，什么都不发愁！SEO草根大多是新手，一穷二白，手头上没有自己的站群，有站也没有PR，没排名，但是这不要紧！只要你多交善广，靠人脉链接！
欢迎转载，请注明本文来自：SEO http://www.3uf.com 转载时必须以链接形式注明作者和原始出处及本声明
人脉链接前提你结交的朋友手头都有站，靠关系加个链接是没有问题的。都说朋友多了路好走，这话说的没错！认识站长朋友的方式很多，BBS、QQ群、聊天室等,在人家有困难，有问题的时候，如果自己有能力帮助，就帮一把。大家都有共同的兴趣爱好就好好探讨一番，没准你们就成为了创业好友！总之，你认识的人越多，人脉链接就越多！

二、实物链接 vvv

有时候你有的别人不一定有，你有的也许正是别人急需的！度虎谷大赛时风采飞杨曾经来了个送登陆奇兵加他友情链接的招数。你在网上混这么久了，肯定会淘到一些好"宝贝",拿这些实物去跟别人交换一下，别人的代价就是加你一个链接。

所以SEO草根从现在起就留心多收藏些好东东，比如说电子版书籍，群发软件，免杀木马，论坛注册码，QQ靓号，QQ秀，收费会员资源等等。这不算是买链接，不用钱的，都是拿一些实物交换。有时候这些是一些站长朋友急需，他的代价是在站上加你一个链接，你给他的正是他所急需的。 vvv

三、指点链接 vvv

平时可以找一些网站，如果能发现哪里出错了或者其他站长没有发现的问题，可以指点给站长，他感谢你时就让他加上你的链接。还有一个是如果你使用的WEB程序出现了漏洞，你及时把自己的补丁打上后，可以看看其他使用相同程序的站长朋友有没有打上补丁，如果没有就提醒他一下，作为帮助的回报就时加一下自己的链接。PW今年时大漏洞，我没有及时打上补丁，一个站长朋友好心提示我，当时很感激，心甘情愿的为他加了友情链接。
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四 、博客链接

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写博客评论时加上自己的链接，这样虽然在搜索引擎的权重中低，但是可以积少成多。但是要记住，不是在一个很短的时间段群发，这样有可能认为是作弊。

五 、其他的链接方式

其他的外部链接方式还有很多，象论坛签名，在搜索引擎常去的论坛将自己的站加到个性签名里。软文链接，如果你有文笔、有创新、有思路不妨把它写下来，把自己站的链接加进去，分享给别人，又可以为自己增加外部链接。总之，增加外部链接的方式有很多，需要SEO草根挖掘和实验，到时候别忘分享哦！

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